347 komposisi kimia keluli tahan karat Magnitud darah vena atau kapilari, khusus untuk tindak balas sel T SARS-CoV-2, menentukan imuniti kepada COVID-19.

Terima kasih kerana melawat Nature.com.Anda menggunakan versi penyemak imbas dengan sokongan CSS terhad.Untuk pengalaman terbaik, kami mengesyorkan agar anda menggunakan penyemak imbas yang dikemas kini (atau lumpuhkan Mod Keserasian dalam Internet Explorer).Di samping itu, untuk memastikan sokongan berterusan, kami menunjukkan tapak tanpa gaya dan JavaScript.
Peluncur menunjukkan tiga artikel setiap slaid.Gunakan butang belakang dan seterusnya untuk bergerak melalui slaid, atau butang pengawal slaid di hujung untuk bergerak melalui setiap slaid.

347 komposisi kimia keluli tahan karat

Keluli Tahan Karat 347 Tiub Gegelung Komposisi Kimia

Komposisi kimia dan sifat mekanikal tiub gegelung keluli tahan karat 347 adalah seperti berikut:
- Karbon – 0.030% maks
- Kromium – 17-19%
- Nikel – 8-10.5%
- Mangan – 1% maks

Sifat Mekanikal Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347

Menurut Pengeluar Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347, Sifat Mekanikal Tiub Gegelung 347:
- Kekuatan Tegangan (psi) – 75,000 min
- Kekuatan Hasil (psi) – 30,000 min
- Pemanjangan (% dalam 2″) – 25% min
- Kekerasan Brinell (BHN) – 170 maks

Aplikasi & Penggunaan Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347

• Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 yang digunakan di Kilang Gula.
• Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 yang digunakan dalam Baja.
• Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 yang digunakan dalam Industri.
• Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 digunakan dalam Loji Kuasa.
• Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 yang digunakan dalam Makanan dan Tenusu.
• Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 yang digunakan dalam Loji Minyak dan Gas.
• Pengeluar Tiub Gegelung Keluli Tahan Karat 347 yang digunakan dalam Industri Pembinaan Kapal.

Sel T khusus SARS-CoV-2 dianggap melindungi daripada jangkitan dan perkembangan COVID-19, tetapi tiada bukti langsung untuk ini.Di sini, kami membandingkan ukuran darah keseluruhan sel T positif interferon-γ spesifik SARS-CoV-2 dengan keputusan ujian diagnostik COVID-19 yang positif (PCR dan/atau aliran sisi) dalam tempoh 6 bulan selepas pengumpulan darah Lian.Di antara 148 peserta yang menderma sampel darah vena, magnitud tindak balas sel T khusus SARS-CoV-2 adalah lebih tinggi dengan ketara pada mereka yang kekal dilindungi berbanding mereka yang dijangkiti (P ​​<0.0001).% risiko jangkitan, manakala intensiti tinggi mengurangkan risiko ini kepada 5.4%.Keputusan ini digeneralisasikan kepada 299 peserta tambahan yang menguji ujian darah kapilari berskala yang boleh memudahkan akses kepada data imuniti sel T berskala populasi (14.9% vs. 4.4%).Oleh itu, pengukuran sel T khusus untuk SARS-CoV-2 boleh meramalkan risiko jangkitan dan harus dinilai apabila memantau status imun individu dan populasi.
Mengukur dan memahami tindak balas imun terhadap jangkitan SARS-CoV-2 adalah penting untuk membangunkan strategi masa depan yang berkesan untuk meminimumkan kesihatan awam dan kesan ekonomi akibat wabak COVID-19 pada masa hadapan.Pengenalpastian korelasi imun akan memberikan maklumat penting tentang kerentanan populasi terhadap jangkitan virus, mungkin amaran awal kemasukan ke hospital puncak, dan juga membolehkan orang ramai menguruskan sendiri risiko jangkitan dan risiko menjangkiti orang lain.Pengawasan imun telah terbukti kritikal untuk menilai keberkesanan vaksin COVID-19 dalam pesakit yang sihat dan berisiko tinggi1,2,3 terutamanya dalam mutan SARS-CoV-24, dan pengesanan imunokompromi bermakna keperluan untuk meningkatkan Imuniti Dapatkan vaksin dan mencegah wabak masa depan.
Tahap imuniti individu terhadap jangkitan SARS-CoV-2 bergantung kepada pelbagai faktor: viral load pada masa pendedahan, varian virus, umur, status vaksin/jangkitan sebelumnya, komorbiditi, ubat-ubatan dan yang paling penting, jangkitan anti-SARS-CoV .2 tindak balas imun adaptif berlaku pada masa pendedahan kepada virus5.Penilaian tindak balas imun terhadap jangkitan SARS-CoV-2 dan/atau vaksinasi telah memfokuskan pada ujian serologi yang mengukur kehadiran antibodi khusus untuk protein struktur (cth spike glycoprotein).Walau bagaimanapun, kehadiran atau ketiadaan antibodi sahaja tidak menentukan dengan tepat tindak balas imun pelindung, kerana tindak balas dilemahkan dengan ketara dari masa ke masa6 dan peneutralan varian SARS-CoV-2 dalam pemulihan atau individu yang divaksin dua kali Aktiviti lemah, yang boleh membawa kepada peningkatan yang besar. bilangan jangkitan terobosan7.Sesungguhnya, perlindungan terhadap gejala COVID-19 yang disebabkan oleh varian Omicron (B.1.1.529) merosot kepada kira-kira 10% selepas hanya 4-6 bulan vaksinasi mRNA, walaupun perlindungan terhadap penyakit teruk berterusan >68% selama sekurang-kurangnya 7 bulan8 .Mengukur tindak balas sel T memori adaptif, yang memberikan perlindungan jangka panjang terhadap jangkitan virus, adalah penunjuk terbaik kerentanan kepada jangkitan SARS-CoV-2, dan oleh itu petunjuk yang lebih baik tentang risiko ujian positif untuk COVID-199, kerana T tertentu sel boleh menghalang jangkitan.tanpa seroconversion10,11.Walau bagaimanapun, pengukuran tindak balas sel T kurang mendapat perhatian kerana kesukaran metodologi dan masalah logistik dalam mendapatkan dan mengangkut sampel darah vena, terutamanya semasa menjalankan kajian pemerhatian yang besar untuk menilai keberkesanan vaksin dan memantau imuniti.Walau bagaimanapun, individu yang divaksinasi menunjukkan aktiviti sel T yang teguh terhadap varian SARS-CoV-2, yang berpotensi mengimbangi kehilangan kereaktifan antibodi untuk mengehadkan keterukan COVID-1912,13.
Di sini, kami berusaha untuk memahami sama ada satu ukuran tindak balas sel T SARS-CoV-2 boleh meramalkan risiko mutlak jangkitan SARS-CoV-2 dalam tempoh 6 bulan selepas pensampelan darah, tanpa mengira faktor yang mempengaruhi imun sebelumnya.Untuk menjadikan ujian sel T berdaya tahan tinggi dan boleh digunakan untuk kajian yang lebih besar, kami juga cuba menjadikan ujian itu diperkecilkan supaya ia boleh dilakukan menggunakan sampel darah batang jari kapilari.
Kami mengukur tindak balas imun selular dan humoral dalam penderma yang sihat menggunakan pengesanan gabungan sel T SARS-CoV-2 dan antibodi IgG berdasarkan darah vena keseluruhan (untuk ciri-ciri peserta, lihat Mac 2022 14. Dalam penderma yang diberi vaksin, SARS-CoV-2- tindak balas T-selular tertentu ditentukan dengan mengukur tahap interferon-γ plasma (IFN-γ) berikutan rangsangan darah keseluruhan dengan peptida SARS-CoV-2 (seperti sebelum ini, rujukan 14,15,16,17,18) dan tindak balas IgG yang berkaitan dengan nukleokapsid (N) meningkat pada mereka yang melaporkan jangkitan sebelumnya, walaupun kedua-dua tindak balas lebih tinggi pada penderma yang tidak dijangkiti sebelum ini, maksimum dalam badan (Rajah 1a, b). Tindak balas IgG terhadap glikoprotein pancang (RBD, S1, S2) adalah tertinggi dalam penderma vaksin yang dijangkiti sebelum ini (Rajah 1c-e).
tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 diukur dengan ujian darah keseluruhan vena dan berdasarkan vaksinasi peserta dan status jangkitan SARS-CoV-2 sebelumnya (disahkan oleh PCR dan/atau ujian aliran sisi)' Vac + /Inf +' n = 60 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 82 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kuning), 'Vac-/Inf-' n = 1 (tidak digunakan).Tindak balas pengikatan IgG khusus SARS-CoV-2 menyasarkan nukleokapsid (“N”) (b; ****P < 0.0001, **P = 0.0016), domain pengikat reseptor berduri (“RBD”) (c; ** P = 0.0022, *P < 0.015), subunit pancang 1 (“S1”) (d; ***P = 0.0005, *(Vac + /Inf+ lwn. Vac + /Inf-) P = 0.022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0.012) dan subunit puncak 2 (“S2”) (e) diukur dengan ujian darah keseluruhan vena dan berdasarkan vaksinasi peserta dan SARS -CoV-2 sebelumnya (disahkan oleh PCR dan/ atau ujian aliran sisi) status berjangkit.'Vac + /Inf +' n = 60 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kuning).Perbandingan dibuat menggunakan ujian Kruskal-Wallis, diselaraskan untuk pelbagai perbandingan menggunakan ujian Dunn.Data dipaparkan sebagai carta (garisan tengah pada median, had atas pada persentil ke-75, had bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili penderma.Data mentah disediakan dalam bentuk fail data mentah.
Selepas pensampelan darah, peserta diminta melaporkan sendiri keputusan ujian PCR dan/atau aliran sisi positif untuk COVID-19;jika peserta diuji positif antara 1 September 2021 dan 29 Disember 2021, mereka dianggap dijangkiti Delta (B.1.617.2) varian coronavirus dan Omicron (B.1.1.529) kepada Public Health Wales selepas 29 Disember 2021, apabila pilihan kebimbangan ini menjadi dominan.Di antara 148 penderma yang boleh dinilai, kami memerhatikan kadar jangkitan sebanyak 26.3% (39/148) dalam tempoh 6 bulan selepas menderma darah, 38 daripadanya menerima dos kedua atau ketiga vaksin COVID-19 (penembusan jangkitan berlaku selepas Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) vaksin mRNA atau vaksin AstraZeneca (ChAdOx1 nCoV-19));penderma yang tidak divaksin juga dijangkiti.Magnitud tindak balas sel T IFN-γ-positif SARS-CoV-2 khusus adalah jauh lebih rendah pada mereka yang melaporkan ujian diagnostik positif untuk COVID-19 berbanding penderma yang tidak dijangkiti (P ​​<0.0001; Rajah 2a), terutamanya disebabkan oleh induksi optimum tindak balas sel T melalui vaksinasi dalam sesetengah peserta (P = 0.050; Rajah Tambahan 1).Tiada korelasi antara magnitud tindak balas sel T IFN-γ+ dan masa kepada keputusan ujian COVID-19 yang positif (Tambahan Rajah 2).Sebaliknya, tindak balas IgG pengikat RBD-, S1-, S2 (Rajah 2b-d) mahupun tindak balas antibodi peneutral RBD-, S1 tidak khusus untuk jenis liar atau delta SARS-CoV-2 (B.1.617 ).) (Tambahan Rajah 3) boleh membezakan antara orang yang berisiko dijangkiti.Walau bagaimanapun, tindak balas IgG berkaitan N yang rendah terhadap SARS-CoV-2 dikaitkan dengan risiko jangkitan COVID-19 (P = 0.0084; Rajah 2e);mereka yang diuji positif adalah 85% kurang berkemungkinan (P = 0.00035; ATAU 0.15, 95).% CI: 0.047–0.39 (Tambahan Rajah 4).
Sampel darah vena daripada penderma yang sihat (n = 148) menilai tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 (a; ****P <0.0001) dan pengikatan reseptor Spike kepada SARS-CoV khusus -2 rangsangan.domain (“RBD”) (b), subunit spike 1 (“S1″) (c), subunit spike 2 (“S2″) (d), dan nukleokapsid (“N”) (e; **P = 0.0084 ) .Peserta yang diuji positif untuk COVID-19 (PCR dan/atau aliran sisi) dikenal pasti;semua jangkitan berlaku dalam tempoh 6 bulan pensampelan darah.Perbandingan dibuat menggunakan ujian Mann-Whitney dua ekor.Data dipaparkan sebagai carta (garisan tengah pada median, had atas pada persentil ke-75, had bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili penderma.ns tidak penting.Peta haba f menunjukkan korelasi kedudukan Spearman antara pembolehubah untuk set data yang ditentukan.Perbandingan yang tidak signifikan secara statistik dikecualikan daripada matriks dan ditandakan dengan sel kosong.Data mentah disediakan dalam bentuk fail data mentah.
Potongan positif diagnostik pratetap 14 dianggap terlalu sewenang-wenang untuk menilai risiko jangkitan semula, jadi julat antara kuartil ditubuhkan untuk mewujudkan parameter risiko mutlak.Model statistik, yang hanya memasukkan pembolehubah yang mempunyai kesan ketara ke atas keputusan, menunjukkan bahawa magnitud tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 adalah biomarker imun yang paling penting untuk menentukan peluang individu untuk menjadi. diuji untuk COVID.-19 positif (Rajah 2f dan Rajah Tambahan 4).Pesakit dengan tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 dalam kuartil ketiga (194-489 pg/ml IFN-γ) dan keempat (>489 pg/ml IFN-γ) 65% (P = 0.055; ATAU 0.35, 95% CI: 0.11–1.00) dan 90% (P = 0.0050; ATAU 0.098, 95% CI: 0.014–0.42) mempunyai lebih ramai peserta.Peluangnya adalah tipis (Tambahan Rajah 4).Secara keseluruhan, peserta dengan tindak balas sel T spesifik SARS-CoV-2 daripada darah vena ≤79 pg/mL IFN-γ mempunyai risiko 43.2% untuk jangkitan terobosan pada 6 bulan, berbanding dengan tindak balas >489 pg/mL.ml IFN-γ mempunyai risiko jangkitan sebanyak 5.4% (jadual 2).
Ujian darah keseluruhan vena adalah terhad dalam skop kerana keperluan untuk pengumpulan sampel oleh phlebotomist.Untuk meningkatkan ketersediaan ujian sel T dan IgG untuk SARS-CoV-2, kaedah pensampelan darah kapilari alternatif telah dibangunkan untuk membolehkan peserta mendapatkan sampel darah batang jari di rumah.Untuk pengetahuan terbaik kami, tidak ada laporan sebelumnya mengenai pengukuran fungsi sel T khusus antigen dalam sampel darah kapilari.Korelasi yang kuat sebelum ini telah ditunjukkan antara kiraan limfosit yang diperoleh menggunakan sampel darah kapilari dan vena yang setanding.Selain itu, telah dilaporkan bahawa ujian berasaskan darah keseluruhan yang mengukur tindak balas sel T spesifik SARS-CoV-2 hanya menggunakan 320 μL darah vena,20 menghapuskan kebimbangan tentang kekerapan sel T progenitor dalam sampel darah kapilari.
Kami menggunakan ujian kolaboratif terstandard tinggi ini bagi sel T SARS-CoV-2 dan antibodi IgG berdasarkan darah keseluruhan kapilari untuk mengukur tindak balas imun selular dan humoral dalam peserta yang mempunyai pelbagai komorbiditi dan status vaksin/jangkitan terdahulu (Jadual 1).diambil dari seluruh UK antara 24 Januari dan 14 Mac 202214. Majoriti (90.9%) sampel jari diperoleh dengan betul dan dihantar ke makmal dalam tempoh 24 jam selepas pengumpulan.Dalam sesetengah kes, sampel diterima dalam masa 48 jam selepas pengambilan darah, tetapi tiada satu pun daripada sampel ini melepasi semakan kawalan kualiti dan tidak menjejaskan keseluruhan sel T atau ukuran antibodi (Tambahan Rajah 5).Walaupun terdapat perbezaan dalam magnitud tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 yang diukur dalam sampel darah kapilari dan vena masing-masing dalam sesetengah individu, tidak terdapat perbezaan yang ketara secara keseluruhan (P = 0.88; Rajah Tambahan 6). ).).
Tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 meningkat dengan ketara pada individu yang divaksinasi yang juga melaporkan jangkitan sebelumnya (P = 0.0001), tetapi tidak jauh lebih tinggi daripada individu penderma yang tidak dijangkiti sebelum ini (P = 0.19, Rajah. 3a).).Tindak balas IgG terhadap spike glycoprotein (RBD, S1, S2) adalah jauh lebih tinggi dalam penderma yang divaksinasi berbanding dengan penderma yang tidak divaksinasi, tanpa mengira status jangkitan sebelumnya (Rajah 3b-d).Menariknya, min tindak balas IgG terikat N adalah tertinggi dalam peserta yang tidak dijangkiti sebelum ini berbanding peserta yang divaksinasi, walaupun ini tidak mencapai kepentingan (Rajah 3e).Antara penderma yang tidak divaksinasi dan tidak dijangkiti yang mengisytiharkan sendiri, 15 daripada 37 (40.5%) peserta positif untuk IgG berkaitan N, melebihi ambang yang ditetapkan sebelum ini iaitu 2.0 BAU/mL14;15 peserta ini Dua belas daripada pesakit ini diuji positif untuk tindak balas sel T IFN-γ+ melebihi ambang yang ditetapkan sebelum ini iaitu 22.7 pg/mL IFN-γ14.Oleh itu, kemungkinan besar peserta ini sebelum ini dijangkiti SARS-CoV-2 dan tidak diuji untuk COVID-19 kerana pilihan peribadi, kekurangan PCR dan/atau peralatan aliran sisi, atau tanpa gejala.Walaupun terdapat korelasi yang signifikan antara tindak balas sel T kepada tahap IFN-γ+ dan IgG berkaitan N dalam penderma yang tidak divaksinasi (P = 0.0044; Rajah Tambahan, tindak balas IgG berkaitan N menurun lebih cepat daripada tindak balas IgG berkaitan N, manakala IFN-γ + Tindak balas sel T dikekalkan tanpa mengira status vaksinasi, walaupun bilangan penderma pada 50 minggu selepas cabaran adalah rendah (Tambahan Rajah 8). Jenis vaksinasi biasanya sedikit berbeza dalam tindak balas IgG yang diperhatikan khusus untuk SARS-CoV- 2, T sel dan berkaitan RBD, walaupun peserta yang menerima dua dos BNT162b2 diikuti dengan vaksinasi semula mRNA1273 menunjukkan tahap sel IFN-γ + T yang jauh lebih tinggi lebih sensitif kepada SARS-CoV-2 berbanding mereka yang menerima dua dos ChAdOx1 dan BNT162b2 (Tambahan Rajah 9) Di samping itu, komorbiditi yang dilaporkan mempunyai sedikit perbezaan keseluruhan dalam tindak balas sel T yang diperhatikan berbanding dengan penderma yang sihat (Tambahan Rajah 10).
tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 diukur dengan ujian kapilari darah keseluruhan dan berdasarkan vaksinasi peserta dan status berjangkit SARS-CoV-2 sebelum ini (disahkan oleh ujian PCR dan/atau aliran sisi).'Vac + /Inf +' n = 42 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 158 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 33 (kuning), 'Vac- /Inf-' n = 37 (kelabu).****P < 0.0001, ***P = 0.0001, *(Vac+/Inf- lwn. Vac-/Inf-) P = 0.045, *(Vac-/Inf+ lwn. Vac- /Inf-) P = 0.014 .Tindak balas pengikatan IgG khusus SARS-CoV-2 kepada domain pengikat reseptor pancang (“RBD”) (b; ****P < 0.0001, ns: tidak ketara), subunit pancang 1 (“S1”) (c; * * **P <0.0001, ns: tidak ketara), subunit spike 2 (“S2″) (d; ****P <0.0001, ***P = 0.0005, *P = 0.016 ) dan nukleokapsid (“N”) (e; ****P <0.0001, ns tidak signifikan) diukur menggunakan analisis darah keseluruhan vena dan berdasarkan vaksinasi peserta dan SARS-CoV-2 sebelumnya (disahkan oleh analisis PCR dan/atau aliran sisi) Jangkitan dibahagikan dengan status.'Vac + /Inf +' n = 46 (hijau), 'Vac + /Inf-' n = 182 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 34 (kuning), 'Vac-/Inf-' n = 37 (kelabu).Perbandingan dibuat menggunakan ujian Kruskal-Wallis, diselaraskan untuk pelbagai perbandingan menggunakan ujian Dunn.Data dipaparkan sebagai carta (garisan tengah pada median, had atas pada persentil ke-75, had bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili penderma.Data mentah disediakan dalam bentuk fail data mentah.
Seperti sebelum ini, peserta diminta melaporkan hasil PCR dan/atau aliran darah sisi yang positif untuk COVID-19;menurut Agensi Kesihatan UK, peserta dianggap telah dijangkiti coronavirus Omicron (B.1.1.529) pada masa menguji varian virus positif, kerana ia merupakan varian dominan di UK semasa tempoh kajian.Di antara 299 penderma yang boleh dinilai, kami memerhatikan kadar jangkitan sebanyak 8.0% (24/299) dalam tempoh tiga bulan selepas pendermaan kapilari, tujuh daripadanya tidak diberi vaksin.Perkadaran komorbiditi di kalangan semua peserta adalah lebih rendah pada mereka yang diuji positif untuk COVID-19 (10.7%) berbanding mereka yang diuji negatif untuk COVID-19 (24.4%, Jadual 1), yang mungkin disebabkan oleh fakta bahawa peserta dengan ujian tertentu. penyakit lebih berhati-hati dan melindungi daripada kemungkinan akibat seperti diabetes dan kanser.Seperti yang diperhatikan dalam kohort darah vena, sel T interferon-γ (IFN-γ) spesifik spesifik SARS-CoV-2-positif diukur dalam sampel darah kapilari daripada individu yang melaporkan ujian diagnostik positif untuk COVID-19.Magnitud tindak balas adalah jauh lebih rendah daripada penderma yang tidak dijangkiti (P ​​= 0.034; Rajah 4a) disebabkan oleh induksi tindak balas sel T yang agak lemah melalui vaksinasi dan/atau jangkitan terdahulu (Tambahan Rajah 11).Begitu juga, tindak balas IgG pengikat RBD-, S1-, S2 (Rajah 4b-d) mahupun tindak balas antibodi peneutral RBD-, S1 tidak khusus untuk jenis liar atau delta SARS-CoV-2 (B. 1.617).(Rajah tambahan 12).Individu yang mempunyai sebarang risiko jangkitan yang ketara boleh dikenal pasti.Berbeza dengan kohort vena, tindak balas IgG berkaitan N juga tidak membezakan risiko COVID-19 (Rajah 4e), menunjukkan bahawa varian Omicron (B.1.1.529) meningkatkan pengelakan imun dalam individu yang dijangkiti sebelum ini, seperti yang diterangkan baru-baru ini 21. Sebaliknya, kekuatan tindak balas sel IFN-γ T khusus SARS-CoV-2 sekali lagi merupakan pembolehubah yang paling penting dalam menentukan kemungkinan individu ujian positif untuk COVID-19 (Rajah 4f).Secara keseluruhan, peserta dengan tindak balas sel T kapilari khusus SARS-CoV-2 ≤23.7 pg/mL IFN-γ mempunyai 14.9% risiko jangkitan pada tiga bulan berbanding tindak balas >141.6 pg/mL.ml IFN.-γ mempunyai risiko jangkitan sebanyak 4.4% (Jadual 2).
Tindak balas sel T IFN-γ+ khusus untuk SARS-CoV-2 (a; *P = 0.034) dan domain pengikat reseptor sasaran IgG khusus IgG (“RBD”) (b), subunit pancang 1 (' S1′) (c), subunit spike 2 ('S2′) (d) dan tindak balas pengikatan nukleokapsid ('N') (e).Peserta yang dikenal pasti positif untuk ujian COVID-19 (PCR dan/atau ujian aliran darah sisi), semua jangkitan berlaku dalam tempoh 3 bulan selepas pensampelan darah.Perbandingan dibuat menggunakan ujian Mann-Whitney dua ekor.Data dipaparkan sebagai carta (garisan tengah pada median, had atas pada persentil ke-75, had bawah pada persentil ke-25) dengan kumis pada nilai minimum dan maksimum.Setiap titik mewakili penderma.ns tidak penting.Peta haba f menunjukkan korelasi kedudukan Spearman antara pembolehubah untuk set data yang ditentukan.Perbandingan yang tidak signifikan secara statistik dikecualikan daripada matriks dan ditandakan dengan sel kosong.Data mentah disediakan dalam bentuk fail data mentah.
Apabila kita melangkah ke fasa seterusnya pandemik COVID-19, tumpuan akan beralih daripada pencegahan kepada pengurusan risiko individu dan mengenal pasti ahli masyarakat yang terdedah.Mewujudkan korelasi imuniti terhadap COVID-19 adalah penting untuk mengenal pasti dan merawat kumpulan berisiko tinggi ini dengan berkesan.Kini terdapat bukti yang semakin meningkat bahawa imuniti sel T melindungi daripada jangkitan SARS-CoV-2 dan mengehadkan keterukan COVID-1910.Data yang dibentangkan di sini menunjukkan bahawa kekuatan gabungan tindak balas sel T IFN-γ+ khusus SARS-CoV-2 terhadap spike, membran dan protein struktur nukleokapsid memberikan perlindungan yang lebih besar terhadap COVID-19 berbanding pengikatan antibodi.19 menggalakkan atau meneutralkan tindak balas .dan perlu diambil kira semasa menilai imuniti individu dan/atau kumpulan.Virus RNA seperti SARS-CoV-2 atau virus influenza A (IAV) mengelakkan peneutralan serologi dengan berkembang pesat epitop sel B terdedah pada antigen permukaan yang diiktiraf oleh antibodi.Tindak balas imun pelindung yang disediakan oleh sel T mungkin mencerminkan penyasaran epitop dari kawasan protein virus yang lebih terpelihara yang tidak dapat dengan cepat melarikan diri daripada tindak balas imun.Perlindungan pengantaraan sel T terhadap varian baru SARS-CoV-2 adalah serupa dengan perlindungan heterosubtip yang dimediasi oleh penyasaran sel T bagi protein intrinsik yang dipelihara yang dilihat dalam subtipe IAV22,23.
Walaupun potensi yang besar untuk mengukur tindak balas imun selular terhadap COVID-19, perhatian yang agak sedikit telah diberikan kepada pembangunan ujian sel T yang tepat, berkeupayaan tinggi, dan piawai.Kerumitan tradisional dan kos yang berkaitan dengan mengukur tindak balas sel T menghalang penentuan tepat imuniti sel T apabila membuat saringan untuk imuniti populasi yang besar.Walaupun beberapa ujian rangsangan peptida darah keseluruhan komersial telah tersedia baru-baru ini, semua orang pada masa ini memerlukan ahli phlebotomis untuk mendapatkan darah, mengehadkan ketersediaan dan skala.Sistem darah kapilari digunakan secara meluas untuk menentukan kelaziman antibodi SARS-CoV-2 dalam populasi.Kami menyesuaikan ujian darah kapilari untuk melakukan ujian rangsangan peptida darah keseluruhan untuk menilai kereaktifan sel T kepada protein struktur SARS-CoV-2 dan tindak balas antibodi khusus SARS-CoV-2.Malah, pengukuran gabungan antibodi khusus SARS-CoV-2 dan sel T dalam sampel darah kapilari yang sama adalah sangat menarik: (i) mengurangkan keperluan untuk ujian darah berganda bagi setiap peserta, (ii) meningkatkan pengalaman dan pemahaman peserta ;(iii) menambah baik logistik dan mengurangkan pertindihan, (iv) mengurangkan kesan alam sekitar kerana kurang bahan guna makmal dan penghantaran sampel diperlukan.Walaupun kereaktifan IFN-γ keseluruhan adalah serupa antara sampel darah vena dan kapilari yang dipadankan, ia diperhatikan lebih rendah dalam kohort darah kapilari peserta (Rajah 4a) berbanding kohort darah vena (Rajah 2a).Nilai IFN-γ Terdapat beberapa penjelasan untuk penemuan ini, iaitu, sebilangan besar peserta dengan komorbiditi yang memerlukan terapi imunosupresif telah diambil ke dalam kohort pensampelan darah kapilari (Jadual 1) dan Daya maju dan/atau fungsi sel T yang diperoleh daripada vaskular. sampel mungkin rendah, terutamanya dengan mengambil kira keadaan penyimpanan jangka panjang sampel sebelum rangsangan peptida.
Vaksin COVID-19 yang tersedia secara meluas pada masa ini memberikan perlindungan terbaik terhadap penyakit yang teruk bagi kebanyakan penerima dalam tempoh 6 bulan selepas vaksinasi8.Sungguh menggalakkan, walaupun peneutralan serologi yang disebabkan oleh vaksin yang lemah bagi varian SARS-CoV-26,7, tindak balas sel T yang ditimbulkan oleh vaksinasi terhadap SARS-CoV-2 jenis liar kekal sangat reaktif, apabila 25 yang lain muncul.Data yang kami kemukakan di sini menunjukkan kepentingan penilaian yang lebih luas tentang imunogenisiti vaksin, menonjolkan vaksin dengan imuniti sel T yang tidak mencukupi untuk mencegah jangkitan secara tiba-tiba dan penularan virus yang berterusan.Kami juga mendapati bahawa ramai individu yang tidak divaksinasi yang direkrut ke dalam kohort kapilari mempunyai tindak balas yang ketara terhadap sel T spesifik SARS-CoV-2 (dan IgG pengikat N) tanpa mengira vaksinasi sebelumnya, yang mungkin disebabkan oleh jangkitan sebelumnya.Daripada memberi vaksin kepada individu yang sesuai, risiko jangkitan mereka harus dinilai berdasarkan status imunisasi semasa mereka dan pilihan termaklum yang dibuat.
Had kajian ini termasuk jaminan bahawa peserta melaporkan sendiri jangkitan SARS-CoV-2 selepas pengumpulan darah untuk menentukan kaitan imuniti;sesetengah peserta mungkin mempunyai jangkitan tanpa gejala dan tidak dapat menjalani ujian PCR dan/atau aliran sisi untuk COVID-19.Dataset kami juga kekurangan maklumat tentang ubat peserta pada masa pensampelan darah.Di samping itu, memandangkan semua peserta kami melaporkan hanya simptom ringan/sederhana atau tiada simptom, adalah tidak mungkin untuk mengenal pasti tindak balas imun daripada set data kami yang meramalkan peningkatan risiko penyakit teruk dan kemasukan ke hospital untuk COVID-19.Walau bagaimanapun, kehadiran tindak balas sel T CD8+ terhadap epitop khusus nukleokapsid baru-baru ini dikaitkan dengan perlindungan terhadap COVID-1926 yang teruk.Di samping itu, ujian yang digunakan di sini tidak mengukur tindak balas sel T terhadap protein bukan struktur SARS-CoV-2 yang dinyatakan awal tertentu yang baru-baru ini ditunjukkan secara keutamaan terkumpul dalam pekerja penjagaan kesihatan seronegatif yang telah berhubung dengan pesakit yang dijangkiti.Berdasarkan kerja ini, memandangkan kelaziman penularan komuniti pada masa pengambilan dan kemungkinan tinggi jangkitan kontak dalam populasi, bilangan sel T spesifik SARS-CoV-2 yang ditemui dalam ujian kami juga nampaknya mampu dibersihkan.jangkitan subklinikal dalam kohort kami.Akhir sekali, kami tidak mengukur pengeluaran interleukin 2 oleh sel T kerana kerja kami sebelum ini menunjukkan pengenalpastian yang lemah terhadap tindak balas sel T khusus SARS-CoV-214, walaupun tindak balas khusus IL-2 mungkin menunjukkan kereaktifan silang yang sedia ada.sel yang berkaitan dengan pertahanan terhadap jangkitan SARS-CoV-211.
Secara keseluruhan, data ini menyerlahkan keperluan asas untuk kajian membujur jangka panjang yang menggabungkan tindak balas sel T khusus SARS-CoV-2 ke dalam ukuran imuniti berskala populasi.Usaha ini mungkin dibantu oleh pembangunan ujian darah kapilari baru yang mengukur tindak balas sel T.
Projek penyelidikan mengambil peserta dari Februari 2021 hingga Mac 2022. Kohort penderma sihat (n = 148) yang menderma sampel darah vena terdiri terutamanya daripada kakitangan universiti dan pelajar yang mengambil bahagian dalam perkhidmatan saringan COVID-19 Universiti Cardiff atau kakitangan di sebuah sekolah rendah di Cardiff.Semua peserta sebaliknya sihat dan tidak melaporkan mengambil sebarang ubat imunosupresif (lihat Jadual 1 untuk ciri).Kohort peserta yang menderma sampel darah kapilari termasuk semua penderma sukarela (berumur 18+) dari seluruh UK.Antara 24 Januari dan 14 Mac 2022, 342 peserta telah mendaftar dalam kajian itu, di mana 299 daripadanya menyerahkan sampel darah ke makmal.Ramai peserta kekal tidak divaksinasi dan/atau melaporkan komorbiditi yang serius, termasuk penyakit autoimun dan kanser (lihat Jadual 1 untuk ciri-ciri).Kajian ini mendapat kelulusan etika daripada Jawatankuasa Etika Penyelidikan Newcastle dan North Tyneside 2 (ID IRAS: 294246) dan Jawatankuasa Etika Penyelidikan Sekolah Perubatan Universiti Cardiff (rujuk SREC: SMREC 21/01).Semua peserta memberikan persetujuan termaklum bertulis sebelum dimasukkan.Peserta tidak menerima sebarang pampasan untuk menyertai kajian ini.
Sampel darah vena diperolehi dengan venipuncture ke dalam 6 atau 10 ml litium atau natrium heparin vacutainer (BD).Sampel darah kapilari diperoleh dengan lancet jari dan kemudian dikumpulkan dalam bekas mikro heparin (BD).Sekurang-kurangnya 400 µl darah diperlukan;mana-mana sampel yang kurang daripada jumlah ini akan ditolak.Sebab lain untuk penolakan sampel termasuk pembekuan besar-besaran dan/atau hemolisis dan kegagalan untuk mengumpul plasma likat untuk analisis (Tambahan Rajah 5).Sebanyak 299 sampel darah kapilari tersedia untuk menilai tindak balas antibodi, di mana 270 sampel juga tersedia untuk menilai tindak balas sel T.
Tindak balas sel T khusus SARS-CoV-2 dinilai menggunakan ujian COVID-19 Immuno-T (ImmunoServ Ltd) dan dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini14.Secara ringkas, satu vacutaier vena 6 ml atau 10 ml sodium heparin (BD) diambil daripada setiap peserta dan diproses di makmal dalam masa 12 jam selepas pengumpulan darah.Walaupun kebanyakan spesimen telah diproses dalam masa 24 jam, satu 400-600 μl darah kapilari heparinized microbleeding (BD) telah dikumpulkan dalam masa 48 jam selepas pensampelan batang jari.Sampel darah vena dan/atau kapilari telah dirangsang dengan kumpulan peptida berasingan khusus untuk SARS-CoV-2 (varian jenis liar) seperti yang diterangkan sebelum ini14.Pustaka peptida ini mengandungi 420 jujukan 15-mer dengan 11 asid amino bertindih yang merangkumi keseluruhan protein spike (S1 dan S2) (S; protein NCBI: QHD43416 1), nukleokapsid fosfoprotein (NP; protein NCBI: QHD43423 2) dan glikoprotein membran (M ; Protein NCBI: QHD43419 1) urutan pengekodan (dirujuk sebagai "perpustakaan peptida gabungan S-/NP-/M").Semua peptida telah disucikan kepada> 70%, dibubarkan dalam air steril dan digunakan pada kepekatan akhir 0.5 μg/ml setiap peptida.Sampel diinkubasi pada suhu 37°C selama 20-24 jam.Tiub kemudiannya disentrifugasi pada 5000×g selama 3 minit dan ~150 µl plasma dikumpulkan dari bahagian atas setiap sampel darah.Simpan sampel plasma pada -20°C sehingga satu bulan sebelum menjalankan ujian pengesanan sitokin/antibodi.
IFN-γ diukur menggunakan Set Deluxe IFN-γ ELISA MAX (BioLegend, nombor katalog 430116) dan dilakukan mengikut arahan pengilang.Sejurus selepas larutan henti (2N H2SO4) ditambah, plat mikro dibaca pada 450 nm menggunakan pembaca plat BioLegend Mini ELISA.IFN-γ dikira dengan ekstrapolasi lengkung standard menggunakan GraphPad Prism.Nilai di bawah had pengesanan bawah ujian direkodkan sebagai 7.8 pg/ml, nilai di atas had pengesanan atas ujian direkodkan sebagai 1000 pg/ml.
Antibodi IgG RBD/S1/S2/N Anti-SARS-CoV-2 diukur menggunakan panel Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-plex (Bio-Rad, cat. no. 12014634) dan dilabelkan mengikut arahan pengilang.arahan .Nilai pelaporan sampel melebihi had kuantiti telah dianalisis semula pada pencairan 1:1000.Keamatan pendarfluor purata manik diukur pada instrumen Bio-Plex 200 (Bio-Rad).Kepekatan antibodi dikira oleh ujian kawalan tunggal VIROTROL SARS-CoV-2 (Bio-Rad) dan ditukar kepada WHO/NIBSC 20/136 International Reference Standard Units (BAU/mL) menggunakan faktor penentukuran pengeluar.
Antibodi peneutral khusus subunit RBD dan S1 terhadap garisan SARS-CoV-2 jenis liar dan delta (B.1.617) SARS-CoV-2 diukur menggunakan Kit Antibodi Peneutralan Varian SARS-CoV-2 Manusia Bio-Plex Pro (Bio -Rad , bahagian no. 12016897), mengikut arahan pengilang.Ukur purata keamatan pendarfluor pada Bio-Plex 200 (Bio-Rad) dan hitung peratus perencatan (iaitu, peneutralan) menggunakan formula berikut:
Ujian peneutralan berjangkit untuk SARS-CoV-2 telah dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini28.Secara ringkas, 600 PFU SARS-CoV-2 jenis liar diinkubasi dengan pencairan plasma bersiri 3 kali ganda dalam pendua selama 1 jam pada 37°C.Campuran itu kemudiannya ditambah ke dalam sel VeroE6 selama 48 jam.Monolayers telah ditetapkan dengan 4% paraformaldehyde, telap dengan 0.5% NP-40 dan diinkubasi selama 1 jam dalam penampan menyekat (PBS mengandungi 0.1% tween dan 3% susu skim).Antibodi utama (anti-nukleokapsid 1C7, Stratech) telah ditambah kepada penimbal penyekat selama 1 jam pada suhu bilik.Selepas mencuci, antibodi sekunder (anti-tikus IgG-HRP, Pierce) telah ditambah pada penimbal penyekat selama 1 jam.Monolayers telah dibasuh, dibangunkan menggunakan Sigmafast OPD dan dibaca pada pembaca plat Clariostar Omega.Telaga tanpa virus, tanpa virus tetapi tanpa antibodi, dan sera normal yang menunjukkan aktiviti perantaraan dimasukkan dalam setiap eksperimen sebagai kawalan.
Analisis statistik telah dijalankan dalam GraphPad Prism (versi 9.4.1).Normaliti set data diuji menggunakan ujian Shapiro-Wilk.Kriteria bukan parametrik digunakan untuk semua perbandingan.Ujian Mann-Whitney digunakan untuk sampel yang tidak berpasangan.Semua ujian adalah dua belah dengan ambang kepentingan nominal P ≤ 0.05.
Analisis penerokaan awal set data telah dilakukan dalam R (versi 4.0.3).Ini termasuk pembangunan matriks korelasi pangkat univariat Spearman, di mana korelasi antara dua pembolehubah diwakili oleh saiz dan warna petak.Kepentingan statistik antara persatuan dikira menggunakan rho Spearman, di mana nilai ≤0.05 dianggap signifikan.Perbandingan yang tidak signifikan secara statistik dikecualikan daripada matriks dan ditandakan dengan sel kosong.Nilai-P telah diselaraskan untuk berbilang perbandingan menggunakan pembetulan Holm.Model regresi logistik binari telah digunakan untuk mensimulasikan kesan pembolehubah dalam set data pada tindak balas positif terhadap COVID-19.Tindak balas sel T IFN-γ dan skor titer IgG anti-RBD/S1/S2/N ditukar kepada faktor, di mana setiap individu ditugaskan kepada kuartil yang sesuai untuk setiap skor.Selepas itu, model penyelidikan awal dibangunkan menggunakan fungsi glm dalam pakej statistik (V4.0.3).Nisbah kemungkinan yang diperoleh daripada model asal ini diekstrak daripada pekali model menggunakan fungsi 'odds_plot' dalam pakej OddsPlotty (V1.0.2).Semasa membangunkan model pengesahan silang, kami menggunakan fungsi "bestglm" daripada pakej bestglm (V0.37.3) untuk mengehadkan bias pengguna dan memastikan subset terbaik peramal boleh dipilih.Kaedah yang dipilih adalah "lengkap" dan kriteria maklumat yang digunakan untuk menilai kesesuaian model ialah AIC.Aliran kerja yang sama yang diterangkan di atas telah digunakan untuk mendapatkan nisbah kemungkinan.
Untuk maklumat lanjut tentang reka bentuk kajian, lihat abstrak kajian Alam yang dipautkan kepada artikel ini.
Surat dan permintaan untuk bahan hendaklah ditujukan kepada Dr. Martin Scarr atau Profesor Andrew Godkin.Artikel ini menyediakan data asal.
Kod R yang digunakan untuk mencipta model statistik tersedia secara umum tanpa permintaan29.Maklumat cetakan semula dan lesen boleh didapati di www.nature.com/reprints.
Munro, APS et al.Keselamatan dan imunogenisiti tujuh vaksin COVID-19 sebagai dos ketiga (penggalak) selepas dua dos ChAdOx1 nCov-19 atau BNT162b2 (COV-BOOST) di UK: percubaan fasa 2, buta, berbilang pusat, rawak, terkawal.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV et al.Kekebalan, keselamatan dan kereaktifan vaksinasi primer heterolog terhadap COVID-19 (Com-COV2) menggunakan mRNA, vektor virus dan vaksin adjuvant protein di United Kingdom: ujian fasa 2, buta tunggal, rawak, ujian bukan rendah diri.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB et al.Keberkesanan Vaksin COVID-19 dalam Pesakit Imunokompromi: Kajian Sistematik dan Meta-Analisis.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.Penurunan peneutralan varian mikron SARS-CoV-2 B.1.1.529 oleh serum selepas imunisasi.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y, dan Baliser RD Jangkitan terobosan dalam individu yang divaksin SARS-CoV-2: pengukuran, punca dan akibat.Paderi Kebangsaan Imunologi.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG et al.Tindak balas humoral imun yang lemah terhadap vaksin Covid-19 BNT162b2 selama 6 bulan.N. eng.J. Perubatan.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.Aktiviti sera pemulihan dan vaksin terhadap SARS-CoV-2 Omicron.Alam 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.Tempoh perlindungan vaksin mRNA Qatar terhadap subvarian SARS-CoV-2 Omicron BA.1 dan BA.2.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ et al.Kekerapan sel B memori berkurangan dengan jangkitan terobosan vaksin delta COVID-19.Perubatan Molekul EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. et al.Sel T memori reaktif silang dikaitkan dengan melindungi kenalan COVID-19 daripada jangkitan SARS-CoV-2.Komune kebangsaan.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH et al.Tindak balas sel T omicron-reaktif SARS CoV-2 dan sel B yang tersendiri dalam penerima vaksin COVID-19.Sains.Imunologi.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu et al.Sel T khusus SARS-CoV-2 yang diwarisi mengiktiraf silang varian Omicron.Perubatan kebangsaan.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ et al.Pengukuran sel T khusus SARS-CoV-2 daripada darah keseluruhan mendedahkan jangkitan tanpa gejala dan imunogenisitas vaksin dalam individu yang sihat dan pesakit dengan kanser organ pepejal Imunologi https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.Pengukuran pantas sel T spike SARS-CoV-2 dalam darah keseluruhan individu yang divaksin dan dijangkiti secara semula jadi.J. Klinikal.melabur.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.Tindak Balas Vaksin COVID-19 dalam Pesakit Sklerosis Berbilang.pasang.Neuron.91, 89–100 (2022).
Bradley RE et al.Jangkitan COVID-19 yang berterusan dengan sindrom Wiskott-Aldrich hilang selepas vaksinasi terapeutik: laporan kes.J. Klinikal.Imunologi.42, 32–35 (2022).